Методы оценки т-системы. История разработки t-критерия
Министерство путей сообщения Российской Федерации
Дальневосточный государственный университет путей сообщения
Институт дополнительного образования
КУРСОВАЯ РАБОТА
Оценка машин, оборудования и транспортных средств
Специальность: Оценка стоимости предприятия (бизнеса)
Руководитель работы: Меняйлова Маргарита Яковлевна
ХАБАРОВСК 2012 г.
Введение
1. Теоретические основы оценки машин, оборудования и транспортных средств
1.1 Общие определения оценки
1.2 Виды стоимости
1.3 Основные принципы оценки стоимости
1.4 Подходы при оценке машин, оборудования и транспортных средств
2. Оценка рыночной стоимости транспортного средства
2.1 Основные характеристики объекта оценки
2.2 Анализ рынка транспортных средств
2.2.1 Автомобильный рынок России
2.2.2 Анализ рынка спецтехники Хабаровского края и г. Советская Гавань Хабаровского края
2.3 Анализ наилучшего и наиболее эффективного использования
2.4 Расчет стоимости транспортного средства
2.4.1 Доходный подход
2.4.2 Затратный подход
2.4.3 Сравнительный подход
2.5 Согласование результатов
Заключение
Список использованной литературы
Введение
В настоящее время идет активный процесс развития оценочной деятельности как одного из важнейших институтов современной рыночно-правовой экономики. Оценочная деятельность - необходимое условие формирования рыночной экономики и правового государства, создания нормальных экономико-правовых отношений в обществе.
В транспортном комплексе, основным видом активов которого являются транспортные средства, потребность в стоимостной оценке также постоянно возрастает.
Оценка транспортных средств является специализированным и обособленным видом оценочной деятельности, имеющим принципиальные отличия от оценки других видов объектов. Это обусловлено следующими основными причинами:
наличием существенных функциональных, конструктивных и эксплуатационных особенностей;
составом и влиянием факторов, определяющих стоимость транспортных средств;
правовыми, организационными, информационными и методическими аспектами оценки транспортных средств. Правовые нормы по данному виду объектов оценки выделены отдельно в целом ряде нормативных правовых актов (Гражданский кодекс РФ, Таможенный кодекс РФ, Уголовный кодекс РФ и т.д.);
транспортные средства являются объектом повышенной опасности, что вызывает ряд правовых последствий, связанных с возмещением материального ущерба, и требует проведения его оценки;
оценка стоимость автотранспортное средство
структура и параметры рынков транспортных средств существенно отличаются от тех же характеристик товарных рынков других видов объектов оценки, что является принципиальным вопросом при формировании методического и информационного обеспечения для определения рыночной стоимости того или иного транспортного средства.
В связи с этим при профессиональной подготовке экспертов возникает острая необходимость разработки учебно-методического обеспечения оценки стоимости транспортных средств, позволяющего повысить уровень объективности и обеспечить необходимое качество услуг по оценке и соответствие их требованиям действующего законодательства по защите прав потребителей.
На современном этапе развития рыночной экономики России у субъектов хозяйствующей деятельности возникает проблема эффективного использования основных средств. Один из способов решения данной проблемы - объективная оценка основных средств, что и обуславливает значимость данной работы.
Движимое имущество - включает в себя материальные и нематериальные объекты, не являющиеся недвижимостью. Это имущество не связано с недвижимостью постоянно и, как категория, такое имущество характеризуется возможностью быть перемещенным.
Машины и оборудование - вид основных фондов по их натурально-вещественному признаку. К машинам и оборудованию относятся устройства, преобразующие энергию, материалы и информацию. В зависимости от основного (преобладающего) назначения машины и оборудование делятся на энергетические (силовые), рабочие и информационные.
Методика оценки машин, оборудования и транспортных средств имеет много общего с методиками оценки недвижимого имущества, нематериальных активов, бизнеса (предприятия). К особенностям оценки относятся: специфика объекта оценки; сложность проблемы идентификации объекта; высокая актуальность определения физического, морального и внешнего износов; большая зависимость стоимости оборудования от стадии жизненного цикла, на которой находится объект оценки; высокая степень структуризации, ограниченность и подвижность рынка машин и оборудования; необходимость определения, в каких случаях и как учитывать, к примеру, транспортно-заготовительные расходы, прямые затраты, связанные с установкой и наладкой, косвенные издержки на выполнение работ, связанные с приобретением, установкой и запуском оборудования.
Цель данной работы - исследование теоретических и практических аспектов определения рыночной стоимости транспортного средства, методологии оценки машин, оборудования и транспортных средств.
В данной работе рассматриваются основные понятия, принципы и
подходы к оценке машин, оборудования и транспортных средств, выполнена оценка
рыночной стоимости транспортного средства.
1. Теоретические основы оценки машин, оборудования и транспортных средств
1.1 Общие определения оценки
Термин "оценивать" имеет несколько различных значений в зависимости от контекста, в котором он используется. Он может означать: определять цену чего-либо, устанавливать стоимость чего-либо, оценивать количество чего-либо, выносить суждение о качестве или ценности чего-либо.
Термин "оценка" также имеет несколько значений в зависимости от использующегося контекста. Он может означать действие по оценке, заключение о стоимости или отчет, в котором представлены результаты исследований.
Оценка - это деятельность эксперта, обладающего подготовкой, опытом и квалификацией, по систематизированному сбору и анализу рыночных и нормативных данных, необходимых для определения стоимости различных видов имущества на основе действующего законодательства, государственных стандартов и требований этики оценщика.
Оценщик - это человек, который обладает специальными знаниями и образованием для проведения оценки определенного объекта собственности.
Определим цель оценки и цель оценщика:
цель оценки - передать заключение о стоимости;
цель оценщика - действовать как независимая,
незаинтересованная третья сторона при составлении беспристрастного заключения о
стоимости для специальной четко определенной цели.
1.2 Виды стоимости
При осуществлении оценочной деятельности используются следующие виды стоимости объекта оценки: рыночная стоимость; инвестиционная стоимость; ликвидационная стоимость; кадастровая стоимость.
При определении рыночной стоимости объекта оценки определяется наиболее вероятная цена, по которой объект оценки может быть отчужден на дату оценки на открытом рынке в условиях конкуренции, когда стороны сделки действуют разумно, располагая всей необходимой информацией, а на величине цены сделки не отражаются какие-либо чрезвычайные обстоятельства, то есть когда:
одна из сторон сделки не обязана отчуждать объект оценки, а другая сторона не обязана принимать исполнение;
стороны сделки хорошо осведомлены о предмете сделки и действуют в своих интересах;
объект оценки представлен на открытом рынке посредством публичной оферты, типичной для аналогичных объектов оценки;
цена сделки представляет собой разумное вознаграждение за объект оценки и принуждения к совершению сделки в отношении сторон сделки с чьей-либо стороны не было;
платеж за объект оценки выражен в денежной форме.
Рыночная стоимость определяется в следующих случаях:
при изъятии имущества для государственных нужд;
при определении стоимости размещенных акций общества, приобретаемых обществом по решению общего собрания акционеров или по решению совета директоров (наблюдательного совета) общества;
при определении стоимости объекта залога, в том числе при ипотеке;
при определении стоимости неденежных вкладов в уставный (складочный) капитал;
при определении стоимости имущества должника в ходе процедур банкротства;
при определении стоимости безвозмездно полученного имущества.
При определении инвестиционной стоимости объекта оценки определяется стоимость для конкретного лица или группы лиц при установленных данным лицом (лицами) инвестиционных целях использования объекта оценки.
При оценке активов предприятия при банкротстве, реструктуризации, арестах, т.е. в ситуации вынужденной продажи машин и оборудования, применяется понятие ликвидационной стоимости.
При определении ликвидационной стоимости объекта оценки определяется расчетная величина, отражающая наиболее вероятную цену, по которой данный объект оценки может быть отчужден за срок экспозиции объекта оценки, меньший типичного срока экспозиции для рыночных условий, в условиях, когда продавец вынужден совершить сделку по отчуждению имущества.
При определении ликвидационной стоимости, в отличие от определения рыночной стоимости, учитывается влияние чрезвычайных обстоятельств, вынуждающих продавца продавать объект оценки на условиях, не соответствующих рыночным.
При определении кадастровой стоимости объекта оценки
определяется методами массовой оценки рыночная стоимость, установленная и
утвержденная в соответствии с законодательством, регулирующим проведение
кадастровой оценки.
1.3 Основные принципы оценки стоимости
При оценке машин и оборудования, как и при оценке других активов, используются определенные принципы.
В основе оценки лежат четыре группы принципов:
· принципы, основанные на представлениях покупателя-инвестора;
· принципы, связанные с производством;
· принципы, связанные с рыночной средой;
· принцип наилучшего, наиболее эффективного использования.
Принципы, основанные на представлениях покупателя-инвестора:
полезность - это способность актива удовлетворять потребности пользователя в данном месте и в течение данного периода времени. Полезность для каждого собственника индивидуальна и выражается в способности актива приносить доход его потенциальному владельцу;
замещение - это когда расчетливый и осведомленный покупатель не может заплатить за объект собственности больше, чем он может заплатить за другую собственность эквивалентного качества и полезности. Этот принцип лежит в основе всех трех подходов к оценке любого актива: затратного подхода, сравнения продаж и доходного подхода;
ожидание - это когда стоимость создается ожиданием выгод, которые могут быть получены в будущем. Действительно, имеет смысл сегодня вкладывать деньги в тот объект, который в будущем гарантирует определенную выгоду, причем будущий доход, пересчитанный к сегодняшнему дню, должен оправдать сегодняшнее вложение. На этом принципе базируется доходный подход к оценке.
Принципы, связанные с производством:
вклад - стоимость отдельного компонента измеряется его вкладом в стоимость всего объекта собственности или той величиной, которая должна быть вычтена из стоимости всего объекта в случае его отсутствия. Стоимость самого компонента может не равняться величине вклада. Могут быть случаи, когда наличие компонента уменьшает стоимость всего объекта, а не увеличивает его;
сбалансированность - все факторы производства должны находиться в таком соотношении между собой, чтобы доходы от объекта были максимальны.
Принципы, связанные с рыночной средой:
соответствие - стоимость объекта создается и сохраняется тогда, когда его характеристики соответствуют потребностям рынка;
предложение и спрос - цена собственности растет при увеличении спроса и снижается при увеличении предложения. Когда предложение и спрос сбалансированы, рыночная стоимость обычно отражает затраты на производство;
конкуренция - взаимовлияющие усилия двух или более потенциальных продавцов по совершению продажи. Конкуренция является основой максимализации прибыли и экономического развития. Более высокие, чем обычно, прибыли стимулируют обострение конкуренции;
изменение - стоимость объекта не остается постоянной. Она меняется с течением времени под воздействием различных факторов, влияющих на объект.
Принцип наилучшего и наиболее эффективного использования - это вариант использования, который обеспечит объекту наибольший чистый доход в течение заданного периода времени, т.е. тот вариант использования, выбранный среди разумных, возможных и законных альтернативных вариантов, который является физически возможным, достаточно обоснованным и финансово осуществимым и приводит к наивысшей стоимости объекта.
Часто наилучшим и наиболее эффективным использованием любой
машины является то, для которого это оборудование было спроектировано и
построено. Этот принцип является универсальным и связывает между собой все
остальные принципы, лежащие в основе оценочной деятельности.
1.4 Подходы при оценке машин, оборудования и транспортных средств
Теорией и практикой оценки выработаны три методических основополагающих подхода: сравнительный, затратный и доходный.
Сравнительный подход - совокупность методов оценки стоимости объекта, основанных на сравнении оцениваемого объекта с аналогичными объектами, в отношении которых имеется информация о ценах сделок с ними. Сравнительный подход исходит из указанного выше принципа замещения, а получаемая с его помощью стоимость часто называется стоимостью замещения. Методы сравнительного подхода особенно эффективны при существовании активного рынка сопоставимых объектов. Если же рыночная информация бедная, сделки купли-продажи нерегулярные, рынок слишком монополизирован, то оценки этими методами становятся ненадежными, а иногда и невозможными. Тем не менее именно методы сравнительного подхода дают представление о действительно рыночной стоимости.
Затратный подход - совокупность методов оценки стоимости объекта, основанных на определении затрат, необходимых для восстановления либо замещения объекта, с учетом его износа. Затраты на изготовление объекта и его последующую реализацию - очень важный фактор в формировании стоимости. Методы затратного подхода предполагают обязательную оценку возможной полной себестоимости изготовления объекта и других затрат, которые несет изготовитель и продавец. Эти методы незаменимы, если речь идет об объектах, которые практически не встречаются на открытом рынке и изготовляются по индивидуальным заказам, к их числу относится специальное и уникальное оборудование. При оценке затратным подходом как бы моделируется процесс формирования цены продавца (предложения) исходя из соображений покрытия ценой всех произведенных издержек и получения достаточной прибыли. Поскольку методы затратного подхода исходят не из реальных цен на аналогичные объекты, а из рассчитанных нормативных затрат и нормативной прибыли, то они, строго говоря, дают оценку не чисто рыночной стоимости, а так называемой стоимости объекта с ограниченным рынком. В методах затратного подхода важную роль играет также оценка степени износа оцениваемого объекта, это объясняется тем, что получаемая вначале воспроизводственная или восстановительная стоимость объекта не учитывает износа и только на следующем этапе полученная оценка стоимости понижается с учетом полного износа объекта.
Надежность оценки стоимости затратным подходом в значительной степени зависит от полноты и достоверности экономической информации из подотрасли машиностроения, к которой относится оцениваемый объект (экономическая структура цен на продукцию подотрасли, сложившиеся показатели рентабельности продаж, некоторые нормативы затрат и т.д.).
Доходный подход - совокупность методов оценки стоимости объекта, основанных на определении ожидаемых доходов от объекта оценки. При оценке с позиции доходного подхода во главу угла ставятся будущие доходы от эксплуатации объекта на протяжении срока его полезного использования как основной фактор, определяющий современную величину стоимости объекта. В исчислении совокупного дохода от объекта за ряд лет его жизни методы доходного подхода используют приемы, известные из теории сложных процентов.
Методы доходного подхода опираются на такие отмеченные выше принципы, как ожидания, учета факторов производства, наилучшего и полного использования, вклада. Несомненным достоинством этих методов является возможность комплексной, системной оценки, когда нужно оценить не отдельные машины на предприятии, а весь операционный имущественный комплекс, включающий весь парк взаимосвязанного оборудования.
Применение методов доходного подхода сталкивается с тем
ограничением, когда затруднительно оценить чистый доход непосредственно от
оцениваемого объекта в силу того, что этот объект не производит конечной
продукции или конечных услуг или в большей степени имеет социальное значение,
чем экономическое.
2. Оценка рыночной стоимости транспортного средства
2.1 Основные характеристики объекта оценки
Таблица 1 - Общая информация, идентифицирующая объект оценки -
"Автогрейдер ДЗ - 180 № ХЧ 8137 колесный"
Наименование
показателя Характеристика
показателя Источник
информации Наименование
объектов оценки Инвентарная
карточка учета объекта основных средств от 27.02.2012 Регистрационный
№ Паспорт
самоходной машины и других видов техники АА 527542 Год выпуска Технические
характеристики #"607640.files/image001.gif"> где
Иф. o. o. - физический износ объекта оценки; Иф. о. а. - физический износ объекта-аналога. 5. Поправка на местоположение
Введение данной поправки проводилось ввиду того, что
местонахождение объектов - налогов отличается от месторасположения объектов
оценки. Транспортные расходы определены по данным Internet ресурса
#"607640.files/image002.gif">, где
Сср - стоимость объекта оценки сравнительным подходом, руб. а -
балл корректности стоимости аналога, в соответствии с отклонением от
первоначальной стоимости объекта-аналога; Ci - стоимость объекта-аналога после
введения всех корректировок, руб. Баллы по объектам - аналогам распределяются
по 3-х балльной системе, при этом объектам-аналогам с меньшим процентным
изменением (по абсолютной величине) придается наибольшее значение, далее
рассчитывается средневзвешенное значение.
Таблица 6 - Расчет стоимости сравнительным подходом объекта оценки
- "Автогрейдер ДЗ - 180 № ХЧ 8137 колесный"
Наименование Объект оценки Объект-аналог
№1 Объект-аналог
№2 Объект-аналог
№3 "Автогрейдер
ДЗ - 180 № ХЧ 8137 колесный" Автогрейдер
ЧСДМ ДЗ-98 Автогрейдер
ДЗ-98 Автогрейдер
ДЗ-180А Источник
информации http://www.raise.ru/market/earth-moving-machines/graders/67033/
Стоимость
предложения, руб. Корректировка
на условия продажи предложение предложение предложение Корректировка Дата продажи Корректировка Скорректированная
стоимость, руб. Год выпуска Корректировка Скорректированная
стоимость, руб. Техническое
состояние Условно пригодное,
удовлетворительное рабочее,
отличное рабочее,
отличное рабочее,
отличное Процент износа Корректировка Скорректированная
стоимость, руб. Местонахождение г. Советская
Гавань г. Нижний
Новгород г. Челябинск г. Санкт
Питербург Корректировка Скорректированная
стоимость, руб. % отношение
цены продажи и скорректированной стоимости Соотношение
балла к стоимости Рыночная
стоимость прав на объект оценки, руб. ВЫВОД:
Таким образом, рыночная стоимость объекта оценки,
рассчитанная в рамках сравнительного подхода по состоянию на 01.03.2012г.,
составила: 942 661 (Девятьсот сорок две тысячи шестьсот шестьдесят один рубль). Таблица 7 - Метод согласования
Критерий Сравнительный Доходный Затратный Соответствие
оцененной с помощью данного подхода стоимости цели оценки Адекватность,
достоверность и достаточность информации, на основе которой проводились
анализ и расчеты Способность
подхода отразить мотивацию, действительные намерения типичного покупателя /
арендатора и / или продавца / арендодателя, прочие реалии спроса /
предложения в статике и динамике Преобладание
строгих формализованных процедур над интуитивными оценками и допущениями. Действенность
подхода в отношении учета конъюнктуры и динамики рынка финансов и инвестиций
(включая риски) Способность
подхода учитывать структуру и иерархию ценообразующих факторов, специфичных
для объекта, таких как страна производитель, качество производства,
потенциальную доходность и т.п. Сумма баллов Вес подхода Расчет итоговой величины рыночной стоимости объекта оценки
проведен методом согласования и представлен в таблице ниже.
Таблица 8 - Определение итоговой величины рыночной стоимости
объекта оценки
ВЫВОД:
Рыночная стоимость прав объект оценки,
рассчитанная по состоянию на 01.03.2012г. составила: 1 133 000 (Один миллион
сто тридцать три тысячи рублей), в том числе НДС (18%).
В данной работе рассмотрены общие определения оценки, виды
стоимости, принципы и подходы к оценке машин, оборудования и транспортных
средств, выполнена оценка рыночной стоимости транспортного средства
"Автогрейдер ДЗ - 180 № ХЧ 8137 колесный"". Итоговая величина стоимости объекта оценки есть величина
стоимости объекта оценки, полученная как итог обоснованного оценщиком обобщения
результатов расчетов стоимости объекта оценки при использовании различных
подходов к оценке и методов оценки. Она может быть признана рекомендуемой для
целей совершения сделки с объектом оценки, если с даты составления отчета об
оценке до даты совершения сделки с объектом оценки или даты представления
публичной оферты прошло не более 6 месяцев. Значения весовых коэффициентов при оценке транспортного
средства автор выбрал равными: 0, 38 по затратному подходу и 0,62 по
сравнительному подходу. Таким образом, в результате выше изложенных расчетов рыночная
стоимость транспортного средства "Автогрейдер ДЗ - 180 № ХЧ 8137
колесный" составляет: 1 133 000 (Один миллион сто тридцать три тысячи
рублей), в том числе НДС (18%).
Перечень
нормативных актов: 1.
Гражданский
кодекс Российской Федерации. Часть первая от 30.11.1994 № 51-ФЗ (в действующей
редакции) / СЗ РФ от 5 декабря 1994г., № 32. Ст.3301; 2.
Земельный
кодекс Российской Федерации от 25.10.2001 № 136-ФЗ (в действующей редакции) /
Российская газета, № 211-212, 30.10.2001; 3.
Налоговый
кодекс Российской Федерации. Часть первая от 31.07.1998 № 146-ФЗ (в действующей
редакции) / Российская газета, N 148-149, 06.08.1998; 4.
Федеральный
закон от 29.07.1998 г. № 135-ФЗ "Об оценочной деятельности в Российской
Федерации"; 5.
Федеральный
стандарт оценки "Общие понятия оценки, подходы и требования к проведению
оценки (ФСО № 1)", утвержденный Приказом МЭРТ РФ от 20 июля 2007 г. № 256; 6.
Федеральный
стандарт оценки "Цель оценки и виды стоимости (ФСО № 2)" утвержденным
Приказом МЭРТ РФ от 20 июля 2007 г. № 255; 7.
Федеральный
стандарт оценки "Требования к отчету об оценке (ФСО № 3)"
утвержденным Приказом МЭРТ РФ от 20 июля 2007 г. № 254; Перечень
методической литературы: Микерин
Г.И., Павлов Н.В. Международные стандарты оценки. - М., 2003., 379с. 2. Попеско
А.И., Ступин А.В., Чесноков С.А. Износ технологических машин и оборудования при
оценке их рыночной стоимости. - М., 2002. Оценка
машин и оборудования. Учебно-методическое пособие. Федотова М.А. и др. - М.;
Институт профессиональной оценки, 1998. Оценка
машин, оборудования и транспортных средств. Учебно-методическое пособие.
Ковалев А.П. - М.; Академия оценки, 1996.
Заключение
Список
использованной литературы
Об оценках Т-34
О танке Т-34 написаны сотни книг, воспоминаний, научных трудов и различных статей. На эту тему давно высказались те, кто создавал эти боевые машины, воевал на них, обеспечивал их эксплуатацию и ремонт во фронтовых условиях и в тылу, готовил кадры, а равно и те, кто воевал против них или, с другой стороны, был нашим союзником и давал им характеристику со своей точки зрения. Не остались в стороне многочисленные историки и журналисты, пишущие на военно-техническую тематику. Одним словом, об этом танке, как говорится, «не писал только ленивый».
Как правило, боевые машины пытаются сравнивать, учитывая их основные тактикотехнические характеристики (ТТХ) и такие боевые качества, как мобильность, огневая мощь и броневая защита. Конечно, при определении «лучшего» танка (а это почти всегда сугубо субъективная оценка) многие оперировали и другими показателями. Например, возможностью серийного производства и массированного применения, эксплуатационностью, ремонтопригодностью, боевой эффективностью, надежностью, качеством изготовления и т. д.
Танки того периода классифицировались по величине боевой массы - легкие, средние, тяжелые. И сравнения могли проводиться среди танков одной категории, например, «лучший средний танк» или «лучший тяжелый танк». Однако часто бывает довольно сложно сопоставлять отдельные боевые качества.
Например, огневая мощь включает в себя калибр основного вооружения, его могущество, скорострельность, приборы наблюдения и прицеливания, маневр огнем и т. п. Понятие маневренности включает мощность двигателя, максимальную и среднюю скорости движения, возможности по преодолению препятствий, запас хода, удельное давление на грунт и проходимость. Сюда же входит рассмотрение силовой установки танка, его трансмиссии, гусеничного движителя, удобство управления и т. д.
Так что при оценке танков и составлении различных «рейтингов» легко ошибиться и прийти зачастую к парадоксальным выводам.
Тем не менее, подавляющее большинство экспертов, изучающих танки периода Второй мировой войны, отдают предпочтение именно Т-34, приводя в подтверждение своих выводов, в том числе - мнения противника (генерал- майор В.Ф. фон Меллентин, генерал-полковник Г. Гудериан, генерал-фельдмаршал Э. Клейст), а также наших союзников по антигитлеровской коалиции (британский премьер-министр Уинстон Черчилль, британский историк и военный теоретик Б.Г. Лиделл Гарт, специалисты Абердинского полигона в США).
Однако среди историков и журналистов немало и тех, кто активно критикует «тридцатьчетверку» и отдает первенство немецким танкам или американскому М4 «Шерман». И они также приводят в качестве аргументом выводы как наших противников, так и союзников.
То есть общих «узаконенных» критериев оценки боевых машин не существует. И зачастую все зависит от пристрастий авторов, а они тоже могут меняться и часто зависят от конъюнктуры исторического момента.
Как офицеру-танкисту, непосредственно занимавшемуся эксплуатацией Т-34, мне видится, что для сравнительной оценки танков периода Второй мировой войны нужно исходить из роли танка в выполнении той военной (оборонной) доктрины, которой придерживалась страна и в предвоенные годы, и в годы войны. Основные положения военной доктрины складывались и изменялись в зависимости от политики, уровня развития производительных сил, угрозы со стороны вероятного противника и т. п. В соответствии с основными положениями военной доктрины велось военное строительство в разных странах и формировалась стратегия ведения войны.
Основа нашей военной доктрины в предвоенные годы - кратковременная оборона, да и то наступательного характера, до полного развертывания тактических и стратегических резервов, после чего начиналась наступательная война на чужой территории с массированным применением танков во всех видах боя (прорыв обороны противника, стремительное продвижение для захвата территории врага, окружение вражеских войск, уничтожение резервов противника, его опорных баз, штабов, разрушение коммуникаций) до полного разгрома врага и его безоговорочной капитуляции.
Это, в свою очередь, потребовало организации массового производства танков, хотя в стране крайне остро ощущался дефицит высококвалифицированных рабочих и ИТР, хорошо подготовленных танкистов, средств эксплуатации и ремонта. Все это отразилось и на тактико-технических требованиях к разрабатываемому в конце 1930-х гг. танку Т-34.
Конечно, в ходе Великой Отечественной войны (по результатам ее начального периода, когда немцы оказались под Ленинградом и Москвой) военная доктрина и ее «танковая» составляющая были уточнены: танк Т-34 вместо 76-мм пушки стал с 1944 г. выпускаться с 85-мм пушкой (Т-34-85), с увеличенным экипажем; выросло его процентное соотношение в танковых войсках и общее количество машин, а также в разы увеличилось количество самоходных артиллерийских установок (САУ), предназначенных для борьбы с танками противника. Причем САУ в основном были на базе все той же «тридцатьчетверки».
То есть в условиях войны наша военная доктрина принципиально не менялась, и ее положениям идеально соответствовал именно средний танк Т-34.
В Германии также была разработана своя военная доктрина. Ее основу составляла стратегия так называемой «молниеносной войны», которая должна была обеспечить разгром любого противника еще до того, как он окажется способен в полной мере развернуть свой военно-экономический потенциал. Таким образом, официальной военной доктриной Германии в предвоенные годы стала «тотальная и молниеносная война» с массированным применением танков. Большое внимание при этом уделялось подготовке танкистов. Массовое серийное производство танков обеспечивали общий высокий уровень германской промышленности, высококвалифицированные рабочие и ИТР.
Следуя принятым положениям, немцы начали Вторую мировую войну даже без тяжелого танка, только с легкими и средними машинами. При этом на первом этапе им сопутствовал успех. Только после поражения под Москвой стало ясно, что «блицкриг» провалился. Пришлось серьезно пересматривать военную доктрину. Для Германии началась долгая и изнурительная война, к которой она оказалась совершенно не готова.
В ходе войны пришлось перестраивать «танковую» составляющую немецких войск. Так, танк Pz.IV получил длинноствольную пушку, его броневая защита увеличилась почти вдвое. На вооружение начали поступать тяжелые танки «Пантера» и «Тигр», а также различные самоходные установки. Основная задача подавляющего большинства из них заключалась в борьбе с советскими танками, в основном-с Т-34.
Однако промышленность Германии так и не смогла противостоять советскому танкопрому. Количество выпускаемых боевых машин резко упало, а их качество заметно снизилось. Финал известен - полное поражение Германии.
В «Кратком техническом описании танка», изданном в 1943 г., говорится: «Танк Т-34 предназначен для уничтожения живой силы противника, его артиллерии, различных огневых точек, транспортных средств и танков». Как видим, танки противника - далеко не единственная цель, подлежащая уничтожению, да и стоит не на первом месте. Исходя из этого и составлялся боекомплект Т-34, включавший осколочно-фугасные и бронебойные выстрелы. А для борьбы с танками противника служили другие эффективные средства - штурмовая авиация, противотанковая артиллерия, САУ, мины и т. д. У нас, особенно в начальный период войны, широко и довольно эффективно применялись противотанковые ружья и бутылки с зажигательной смесью.
УДК 658.012.4:001
ОЦЕНКА НАУЧНО-ТЕХНИЧЕСКОГО ПОТЕНЦИАЛА ПРЕДПРИЯТИЯ ПО МЕТОДУ ЭКСПЕРТНЫХ ОЦЕНОК
Т.П. Гончаренко, преподаватель
Украинская академия банковского дела
Введение
В последнее время особую актуальность приобрели вопросы, связанные с определением и оценкой экономического потенциала предприятия с точки зрения необходимости позиционирования предприятия в будущем, определения его стратегических возможностей. Одним из узловых компонентов экономического потенциала предприятия является научно-технический потенциал, оценке которого посвящается данная статья
Постановка задачи
В статье предполагается обосновать необходимость применения метода экспертных оценок для определения уровня научно-технического потенциала промышленного предприятия.
Результаты
Одним из основных признаков современного этапа развития промышленного производства является существенный рост результативности заводской науки, возможностей и масштабов практического использования научных достижений. В то же время само производство постоянно усложняется, и для совершенствования его технической базы требуется проведение широкого круга предварительных научных исследований и экспериментов, что, в свою очередь, обеспечивается наращиванием научно-технического потенциала
Процессы глобализации изменяют ориентиры в деятельности промышленных предприятий - на первый план выдвигается конкурентоспособность самого предприятия и его продукции с позиций возможности предоставления на рынок продукта, способного не только удовлетворить определенную потребность, но и сформировать потенциальную. В свою очередь, конкурентоспособность в значительной мере обеспечивается наукоемкостью продукции, способностью предприятия быстро реагировать на изменения вкусов и предпочтений потребителей за счет формирования определенного задела научных знаний (в виде научных разработок).
Комплексной характеристикой, которая позволяет определить возможности предприятия в научно-технической сфере, является научно-технический потенциал, позволяющий позиционировать предприятие с точки зрения конкурентоспособности и инвестиционной привлекательности. В общем случае научно-технический потенциал промышленного предприятия означает возможность организации (предприятия) осуществлять и ускорять научно-технический прогресс в рамках заданных технологий и использовать достижения научно-технического прогресса для предоставления на рынок инновационной продукции.
Рисунок 1 – Научно-технический потенциал в структуре экономического потенциала промышленного предприятия
На промышленном предприятии научно-технический потенциал состоит из: кадров ученых, инженеров, конструкторов и других специалистов соответствующей квалификации; средств научного производства (здания, оборудование, приборы); материалов, сырья, энергии и информационных фондов, предназначенных для проведения научных исследований, разработок и изготовления, опытных образцов новой продукции, а также для организации ее производства и использования в народном хозяйстве. Научно-технический потенциал объективно охватывает как ресурсы накопленных знаний (сами достижения науки), так и сферу их применения (производство) во взаимосвязи. Однако следует заметить, что научно-технический потенциал включает не только ресурсы науки в виде соответствующих научных исследований и разработок, но и способность проектных и конструкторских подразделений, а также производственного аппарата практически реализовывать результаты исследований, т.е. научно-технический потенциал представляет собой современную форму интеграции потенциала науки и потенциала сферы применения знаний.
В этом аспекте особую актуальность приобретают вопросы анализа, диагностики и оценки научно-технического потенциала промышленного предприятия с позиций его инвестиционной привлекательности и конкурентоспособности.
На сегодняшний день однозначной, четко сформированной и апробированной методики оценки научно-технического потенциала предприятия нет. Более того, в большинстве методик по оценке инвестиционной привлекательности предприятия не используются показатели научно-технического потенциала, что значительно искажает оценку.
Анализируя передовой опыт в этом вопросе, мы пришли к выводу, что сегодня одним из наиболее подходящих методов оценки, отвечающим большинству требований, выдвигаемых к подобным оценочным работам, является метод экспертных оценок. Этот метод наиболее прост с точки зрения возможности его применения и возможности получения релевантной информации, не ограничивается количеством экспертов, т.е. чем больше экспертов будет привлечено, тем более точная оценка будет получена.
Экспертный метод базируется на оценивании научно-технического потенциала предприятия по определенным заранее критериям с учетом присваиваемого каждому критерию веса. Критерии можно задавать самостоятельно. Мы сформировали ряд критериев на основе диагностических интервью руководителей предприятий, а также специалистов по исследованию научно-технического потенциала предприятия. Вес каждому критерию был присвоен исходя из объективной значимости самого критерия. Ниже предлагается перечень сформированных нами критериев:
Система управления научно-техническим потенциалом.
Наличие научно-исследовательских подразделений любой формы организации.
Традиции научно-технические и исследовательские.
Квалификация персонала (управленческого, научно-технического).
Результативность научно-технических работ.
Количество патентных разработок и динамика их развития.
Наличие открытых явлений или технологий (запатентованных).
Уровень научных разработок и по отношению к конкурентам.
Уровень научных разработок по отношению к мировым достижениям.
Обеспеченность ресурсами для проведения научно-технических и исследовательских работ.
Информационная поддержка.
Научно-технический и исследовательский задел.
Процедура реализации научных знаний в реальное
производство.
Стратегия НИОКР.
Реакция потребителей на наукоемкость продукции.
Процедура контроля.
Стоимость научных исследований.
Количество научно-исследовательских проектов, которые не привели к получению коммерческого результата.
Маркетинг НИОКР.
Для оценки научно-технического потенциала можно использовать как все предложенные нами критерии, так и выборочно отдельные, но чем большее количество критериев будет использовано при оценке научно-технического потенциала, тем точнее результат будет получен. Так же важным условием является количество привлеченных экспертов, точность полученной оценки зависит от количества проведенных экспертиз.
Полученная оценка может быть использована при анализе инвестиционной привлекательности предприятия, анализе конкурентоспособности предприятия, формировании корпоративной стратегии и стратегий других уровней управления. Научно-технический потенциал играет важную роль в деятельности предприятия, поэтому его оценка может быть использована в различных видах анализа деятельности предприятия, а также при оценке экономического потенциала.
Таблица 1 – Пример формы экспертных оценок
| Критерий | Вес критерия | Экспертная оценка |
||||||||||
| 1 | 2 | 3 |
||||||||||
| Система управления научно-техническим потенциалом | 0,1 | 3 | 5 | 6 | 2 | 7 | 1 | 9 | 2 | 2 | 2 |
|
| Наличие научно-исследовательского подразделений любой формы организации | 0,1 | 1 | 3 | 2 | 4 | 1 | 5 | 5 | 7 | 8 | 1 |
|
| Традиции научно-исследовательские, научно-технические | 0,1 | 7 | 7 | 2 | 5 | 6 | 9 | 5 | 4 | 2 | 7 |
|
| Квалификация персонала | 0,1 | 4 | 5 | 4 | 6 | 3 | 7 | 8 | 9 | 9 | 4 |
|
| Результативность научно-исследовательских и научно-технических работ | 0,05 | 5 | 2 | 3 | 4 | 6 | 7 | 2 | 3 | 4 | 8 |
|
| Количество патентных разработок и динамика развития | 0,05 | 4 | 7 | 5 | 6 | 3 | 3 | 3 | 4 | 8 | 6 |
|
| Наличие открытых явлений или технологий | 0,05 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 |
|
| Уровень научных разработок и по отношению к конкурентам | 0,02 | 2 | 6 | 5 | 4 | 7 | 8 | 9 | 6 | 5 | 4 |
|
| Продолжение таблицы 1 |
||||||||||||
| 1 | 2 | 3 |
||||||||||
| Уровень научных разработок по отношению к мировым достижениям | 0,02 | 7 | 4 | 3 | 6 | 7 | 8 | 9 | 3 | 4 | 5 |
|
| Наличие выданных лицензий на право использования технологии, материала и.т.п. | 0,02 | 2 | 3 | 2 | 3 | 4 | 5 | 4 | 3 | 2 | 1 |
|
| Обеспеченность ресурсами для проведения научно-исследовательских работ | 0,03 | 3 | 5 | 6 | 2 | 7 | 1 | 9 | 2 | 2 | 2 |
|
| Информационная поддержка | 0,02 | 6 | 5 | 4 | 3 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 |
|
| Научно-исследовательский и научно-технический задел | 0,03 | 2 | 3 | 4 | 3 | 2 | 3 | 4 | 5 | 4 | 3 |
|
| Стратегия НИОКР | 0,01 | 5 | 5 | 5 | 6 | 7 | 7 | 8 | 7 | 6 | 5 |
|
| Процедура реализации научных знаний в реальное производство | 0,02 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 8 | 8 | 7 | 6 |
|
| Реакция потребителей на наукоемкость продукции | 0,02 | 4 | 7 | 5 | 6 | 3 | 3 | 3 | 4 | 8 | 6 |
|
| Процедура контроля | 0,01 | 5 | 2 | 3 | 4 | 6 | 7 | 2 | 3 | 4 | 8 |
|
| Стоимость научных исследований | 0,11 | 7 | 7 | 2 | 5 | 6 | 9 | 5 | 4 | 2 | 7 |
|
| Количество научно-исследовательских проектов, не приведших к получению коммерческого результата | 0,11 | 1 | 3 | 2 | 4 | 1 | 5 | 5 | 7 | 8 | 1 |
|
| Маркетинг НИОКР | 0,03 | 2 | 2 | 2 | 3 | 4 | 4 | 3 | 2 | 3 | 4 |
|
В дальнейшем, если необходимо провести сопоставительную оценку научно-технического потенциала различных предприятий, которая может быть использована при анализе инвестиционной привлекательности, на основе полученных оценок можно сформировать матрицу, которая будет отображать позиции предприятия в плоскости «научно-технический потенциал – прибыльность».
Выводы
В данной статье предложена процедура оценивания научно-технического потенциала предприятия по методу экспертных оценок, сформированы критерии, которые используются в данной методике, обоснованы необходимость применения данного метода и важность получения такой оценки.
In this article is offered the procedure of enterprise scientific and technical potential assessment by method of expert evaluation, are formed criteria which are used in the given method, is based the necessity of use of the given method and importance of getting such estimate.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
Загорський В.С. Вовчак О.Д. Інноваційна стратегія підприємства та напрями її реалізації на сучасному етапі. //Регіональні перспективи. - 2000р. - №2-3.
Захарин С.В. Активізація інноваційної діяльності промислових підприємств //Фінанси України. – 2003.- №1.
Велисов А.В. Стратегическое управление корпоративными инновациями. – СПб.:ИСЭПРАН, 1999.-167с.
Сопильняк И.С. Инновационная политика предприятия в условиях рынка //Экономика: проблемы теории и практики: Сб. научных трудов.- Вып. 143 – Днепропетровск: ДНУ, 2002. –92с.
Справочное пособие по анализу деятельности научных организаций /А.А. Казанцев, Б.И. Майданчик, Б.Д. Моторыгин и др. – М.: Финансы и статистика, 1989. – 304 с.
Субпопуляции: Т-клетки хелперы (Th 0, Th 1, Th 2, Th 17), CD 4+ регуляторные Т- клетки (Treg, Tr 1, Th 3), CD 4+ CD 25+ Fox. P 3+ цитотоксические Т-клетки (ЦТЛ), CD 8+
Недостатки биологических методов: ◦ Трудоемкие и сложные в исполнении; ◦ Требуют значительно больше времени до получения конечного результата, а также особых стерильных условий и оборудования для постановки; ◦ Менее специфичные, чем иммунохимические методы. Преимущества: Отличаются достаточно высокой чувствительностью; С биологической точки зрения являются более правильными, поскольку измеряют только биологически активные формы цитокинов. Все методы оценки биологической активности цитокинов in vitro могут быть объединены в 5 основных групп: Биологические методы
Методы оценки биологической активности цитокинов; Иммунохимические методы; Молекулярно-биологические методы. Изучение системы цитокинов проводится на различных уровнях в зависимости от конкретных задач и включает следующие основные подходы: Генетический анализ на предмет отсутствия мутаций в генах цитокинов, их рецепторов и белков внутриклеточных сигнальных систем запуска синтеза и передачи сигнала; Анализ полиморфизма генов цитокинов; Изучение экспрессии генов цитокинов; Изучение уровня продукции цитокинов клетками в культуре; Определение концентраций цитокинов в биологических жидкостях; Изучение синтеза цитокинов на уровне отдельных клеток; Изучение синтеза цитокинов в тканях. Методы оценки функционирования системы цитокинов
Анализ на уровне клеток-продуцентов (мононуклеарные клетки, лимфоциты, лейкоциты, макрофаги, ДК и др.) Генный уровень - Исследование генов, которые ответственны за синтез цитокинов и их полиморфизмов, методами, основанными на ПЦР. - Идентификация адаптерных и других молекул, которые проводят сигнал, запускающий транскрипцию цитокиновых генов (ПЦР, иммуноблоттинг и др.). Клеточный уровень - Выявление и определение количества клеток (Тh 1, Th 2, регуляторные Т- лимфоциты), содержащих цитокины (методом внутриклеточного окрашивания цитокинов). - Подсчет количества клеток, секретирующих анализируемые цитокины (методом ELISPOT). Анализ растворимых цитокинов и их антагонистов в биологических средах организма - Количественное определение цитокинов с помощью ИФА. - Тестирование биологической активности цитокинов на различных моделях (клеточные линии, клетки-мишени и др.). - Иммуногистохимическое окрашивание цитокинов в тканях. - Определение соотношения оппозитных цитокинов (например, про- и противовоспалительных), а также цитокинов и их антагонистов. Определение действия цитокинов на клетки-мишени - Выявление экспрессии рецепторов цитокинов и их генов (проточная цитофлюориметрия, ПЦР). - Анализ молекул, участвующих в передаче сигнала с рецепторов цитокинов в клетках-мишенях (ПЦР, иммуноблоттинг). - Анализ фенотипа и функциональной активности клеток-мишеней после действия на них конкретного цитокина (проточная цитофлюорометрия, методы биологического тестирования) Комплексный анализ системы цитокинов включает несколько последовательных этапов
◦ Оценка пролиферативной активности клеток (стимуляция или подавление); ◦ Оценка цитотоксичности; ◦ Определение экспрессии мембранных рецепторов, синтеза других цитокинов и т. п. ◦ Оценка влияния на функциональную активность клеток (что всегда зависит от типа клеток и от изучаемого цитокина, например оценка хемотаксиса либо оценка завершенности фагоцитоза); ◦ Оценка противоинфекционного действия, как в случае интерферона. 1. Биологические методы
ИЛ 1 определяется в культуре моноцитов, стимулированных ЛПС Используются мыши инбредной линии C 3 H/He. J Тимоциты этих мышей стимулированы митогенами (конканавалин А=Кон. А, фитогемагглютинин=ФГА) и отвечают на ИЛ 2 и митогены Метод: последовательные 2 Х разведения суспензии тимоцитов в специальной среде и контрольных образцов; разведения переносят в 96 -луночные планшеты и инкубируют; затем вносят метку в культуру клеток и счетчиком определяют включение метки КС = M ср(образец)/Мср(контроль), Мср – среднее число имульсов в трех лунках Если КС 3, ИЛ 1 активен (с большой достоверностью) Определение биологической активности ИЛ 1
Используемые клетки: клетки-фибробласты эмбрионов кур и человека, перевиваемые клетки диплоидных фибробластов человека, культура клеток L-929 Используемые вирусы: вирус энцефаломиелита мышей (ВЭМ), вирус везикулярного стоматита мыши Методика: культуру клеток в среде вносят в 96 - луночные планшеты и инкубируют для образования монослоя; далее проводят титрование исследуемых образцов путем 2 Х разведений на монослое; к образцам + ВЭМ и инкубируют их Уровень активности ИФН определяется по обратному значению максимального разведения образца Определение биологической активности ИФН
Для ИЛ-2 используют мышиную клеточную линия HT 2. ИЛ-2 определяют по способности: 1) поддерживать рост Т-лимфобластов, стимулированных митогеном 2) поддерживать длительный рост зависимой линии Т-клеток в культуре CTLL (линия цитотоксических Т-лимфоцитов) ИЛ-4 может усиливать синтез ДНК в В-клетках, стимулированных к пролиферации антителами к Ig. M. Биоанализ для определения И-2 и ИЛ-4.
Цитотоксический индекс: ЦИ = {(a b) a} 100% (a – количество живых клеток в контроле, b - количество живых клеток в опыте) В данном методе используются 2 контроля: ØПоложительный – рекомбинантный ФНО ØОтрицательный – клетки в культуральной среде Условная активность ФНО – значение обратного разведения образца, необходимого для получения 50% клеточной цитотоксичности Определение биологической активности ФНО
Методики количественного определения концентрации растворимых цитокинов в различных биологических жидкостях: Иммуноферментный анализ в различных модификациях (ИФА) Радиоиммунный анализ (РИА) Мультифакторный анализ Для анализа экспрессии цитокинов и их рецепторов на мембранах клеток, а также продукции цитокинов клетками в культуре и в тканях: 1. Цитофлюориметрические методы – для анализа экспрессии поверхностных молекул клеток (мембранных форм цитокинов и рецепторов цитокинов) и определения цитокинов в цитоплазме клеток. 2. Метод оценки продукции цитокинов – единичными клетками в культуре (ELISPOT). 3. Иммуноцитохимия и иммуногистохимия – для оценки содержания цитокинов в цитоплазме клеток на мазках и на срезах тканей. 2. Иммунохимические методы
Большинство иммуноферментных тест-систем адаптированы для работы с любыми биологическими жидкостями. Для измерения уровней цитокинов на системном уровне используют сыворотку или плазму крови. сыворотку крови Обычно их концентрации находятся на пределе чувствительности иммуноферментного метода; более целесообразно измерять их уровни в интересующих исследователя тканях или в биологических жидкостях (слезная жидкость, жидкость десневых карманов, смывы из полостей, моча, спинно-мозговая жидкость). жидкость Иммунохимические методы
Уровень жидкости Тетраметилбензидин Стрептавидин-пероксидаза Вторые антитела, конъюгированные с биотином Цитокин Лунка планшета Оценка секреции ИФН г методом ELISPOT
Принцип работы большинства современных тест-систем заключатся в использовании «сэндвич» -варианта твердофазного иммуноферментного анализа. Высоко специфичны; Быстры (время постановки ИФА составляет менее 5 ч) Относительно просты в исполнении; Порог чувствительности достигает 0, 5 пкг/мл.
Метод РИА сходен с ИФА, но используются меченные радиоактивные изотопы. Чувствительность РИА достаточно высока, но в последнее время метод применяется редко. Для оценки уровня цитокинов используется также другая модификация стандартного ИФА с применением флюоресценции. Вместо цветного субстрата берется субстрат фермента пероксидазы, меняющий под действием фермента флюоресценцию(например, люминол). Радиоиммунный анализ.
Преимущества метода: Одновременный анализ до 100 цитокинов в одном образце Многократное уменьшение объема исследуемого образца Увеличение воспроизводимости результатов Экономия времени, снижение стоимости исследования и трудозатрат Мультифакторный анализ
Мультифакторный анализ Иммуноанализ типа «сэндвич» , в котором антитело связанно с поверхностью микрочастицы (микрошарики, микрочипы) Сходный принцип с ИФА Микрочастицы различного размера (диаметр 4, 4 и 5, 5 мкм) Отдельные виды микрочастиц можно идентифицировать по отличающейся интенсивности флюоресценции и размеру
Принцип метода: ◦ Первые антитела сорбированы на микрошариках; вторые антитела могут быть помечены разными флюорохромами или другими метками, что позволяет проводить измерение уровней сразу нескольких цитокинов; ◦ Далее принцип реакции похож на стандартный ИФА в планшетах Вторые антитела, меченные флюоресцеином цитокин Первые антитела микрошарик Мультифакторный анализ
Методика определения синтеза цитокинов изолированными клетками: (0, 6 мл) Свежая венозная кровь, взятая в емкость с гепарином – тщательно перемешивают и разводят в 5 раз средой RPMI 1640 (2, 4 мл) – добавляют 2 м. М глутамина и 80 мкг/мл гентамицина. В качестве индуктора синтеза группы провоспалительных цитокинов (IL-1, IL-6, TNF), IL-10, IFN- и хемокинов могут быть использованы препараты ЛПС в концентрации 1 -10 мкг/мл. В качестве индукторов синтеза IL-2, IL-4, IFN-γ и других Т- клеточных цитокинов может служить ФГА (50 мкг/мл). 1. индуктор 2. разведенная кровь 37 о. С, 5%СО 2 исследование содержания отбор супернатанта цитокинов в биологическом 24 ч или иммуноферментном тесте У больных подсчитывают количество лейкоцитов и формулу крови по стандартным методикам. Полученные данные пересчитывают на 1 млн лейкоцитов либо мононуклеаров, лимфоцитов или других интересующих клеток в 1 мл крови(с учетом разведений). 3. Определение продукции цитокинов клетками
Определение рецепторов и мембранных форм цитокинов Определение внутриклеточных цитокинов ◦ Блокирование клеточного метаболизма ◦ Фиксация клеток ◦ Пермебиализация клеточной мембраны (используется сапонин в сочетании с блокаторами обратного транспорта (брефелдин А или монензин) для предотвращения экскреции антител из цитоплазмы клеток). Изучение продукции цитокинов клетками методом проточной цитометрии
Может дать дополнительную информацию о состоянии местного иммунитета Иммуногистохимические методы с использованием специфических поликлональных или моноклональных антител к цитокинам Цитокины могут быть обнаружены в цитоплазме клеток в мазках клеточных суспензий; кусочки тканей обычно глубоко замораживают, а затем готовят срезы толщиной 4 -6 мкм в криостате(- 20 о. С) 4. Определение уровней цитокинов в тканях
Метод непрямой иммуногистохимии: ◦ Изучение локализации цитокинов в клетках; с использованием специфических антител к цитокинам ◦ На втором этапе используют антивидовые антитела, меченные флюорохромами (для люминесцентной микроскопии), (возможно выявление как цитоплазматических цитокинов, так и их мембранных форм) или ферментами (для световой микроскопии) В случае ферментов используют биотинилированные антивидовые АТ, а на последнем этапе – стрептавидин-пероксидаза либо стрептавидин-щелочная фосфатаза. Определение уровней цитокинов в тканях
Определение экспрессии генов цитокинов по накоплению м. РНК; Специфические олигонуклеотидные зонды (от нескольких нуклеотидов до целой к. ДНК, соответствующей гену искомого цитокина) При использовании метода гибридизации in situ на свежих криосрезах тканей или мазках клеток для выявления локализации м. РНК цитокинов могут использоваться комплементарные РНК-зонды для РНК- гибридизации. 5. Молекулярно-биологические методы изучения цитокинов
При использовании метода гибридизации in situ на свежих криосрезах тканей или мазках клеток для выявления локализации м. РНК цитокинов могут использоваться комплементарные РНК-зонды для РНК-гибридизаци. метод позволяет определять количество и тип клеток наличие м. РНК необязательно отражает присутствие цитокина в клетке, необходима комбинация методов, позволяющих оценитьи эксперссию м. РНК и синтез данного цитокина Гибридизация in situ для выявления клеток, содержащих м. РНК ИЛ-1β, среди мононуклеаров крови человека
RT-PCR(обратная транскрипция); real-time PCR; Методы microarray (позоляют анализировать одновременно несколько сотен генов) Использование аптамеров Молекулярно-биологические методы изучения цитокинов
Аптамеры - олигонуклеотиды, полученные по технологии SELEX. Используют для количественной оценки уровня цитокинов, в том числе в модификации ИФА, где вместо антител в качестве распознающих цитокины молекул используются аптамеры
Изменение соотношения клеток, продуцирующих различные цитокины, может отражать патогенез заболевания и служить критерием прогноза заболевания и оценки проводимой терапии. Методом внутриклеточного окрашивания определяют экспрессию цитокина на уровне одной клетки. Проточная цитофлуориметрия позволяет подсчитать количество клеток, экспрессирующих тот или иной цитокин. 6. Внутриклеточное окрашивание
Имеются некоторые ограничения: ü с их помощью невозможно анализировать синтез цитокинов единичной клеткой, üневозможно определить количество цитокинпродуцирующих клеток в субпопуляции, üневозможно определить, экспрессируют ли цитокинпродуцирующие клетки уникальные маркеры, üсинтезируются ли различные цитокины разными клетками или одними и теми же.
Врожденные нарушения регуляции Цитокин-зависимый ПИД: наследственный дефект гена гамма цепи рецептора ИЛ-2(делеция АКО 62, 81) Х- сцепленный ТКИД (характеризуется отсутствиемпадением содержания Тлф и резким снижением показателей клеточного и гуморального иммунитета) Дефицит альфа субъединицы ИЛ-7 ТКИД(снижение кол-ва Тлф, но нормальные показатели Влф, НК) Нарушения в системе ИЛ-12, 23, ИФНг и их R повышенная восприимчивость к инфекциям, вызываемых микобактериями и сальмонеллами, Listeria monocytogenes. 7. Роль цитокинов в патогенезе заболеваний
SNP(single nucleotide polymorphism)-важный диагностический маркер, который определяется МБМ, т. к. не удаляется ЕО и сохраняется в популяции. Ген ФНО: замены -308(Г А) и -238(Г А) в нетранслируемой области в зоне промоторных участков. Приводит к увеличению продукции ФНО в 2 -5 раз. В 4 раза чаще встречается у больных с тяжело протекающей церебральной формой малярии, в 7 -8 раз у больных с развившимися тяжелыми нарушениями НС Функциональный полиморфизм генов цтк
Ревматоидный артрит-поражение синовиальной оболочки, хрящевой и костной ткани суставов. У больных с РА в синовиальной оболочке обнаружены плазмоцитоидные и миелоидные ДК, МФ, которые синтезируют широкий спектр цтк, способных индуцировать дифференцировку наивных Тлф. Ключевой медиатор- ФНО и ИЛ 1. ФНО вызывает функциональную активацию синовиальных фибробластов, эндотелаильных клеток и привлечение Лц, синтез цтк, воспаление и ремоделирование ткани сустава. Вмешивается в метаболизм липидов, вызывая кахексию. Ил-6 стимулирует синтез острофазных белков в печени. Роль в развитии аутоиммунной патологии
У больных в ПК выше число клонов Тлф, синтезирующих ИЛ-3, 4, 5, 6, ФНО. Бронхиальная астма- ИЛ 4, 5, 13(Тх2) Обнаружение в пуповинной крови ИФНг, связано с низким риском развития БА. Определение уровня и продукции цтк у детей раннего возраста может быть важным эдементом диагностики для выявления предрасположенности к аллергии. Цтк и аллергия
Цтк служат важными мишенями иммунодиагностики многих заболеваний. Изучение уровня цтк позволяет получить информацию о функциональной активности различных иммунокомпетентных клеток, тяжести воспаления, его переходе на системный уровень и прогнозе, соотношении процессов активации Тх. Оценка функционирования цтк позволяет по- новому подойти к изучению состояния ИС организма в клинической практике. Заключение
Развитие Т-лимфоцитов происходит в центральном органе иммунитета - вилочковой железе (Ф. Бернет, 1971). Среди тимоцитов выделяют три самостоятельные популяции: Т-хелперы (помощники), Т-супрессоры (подавители) и Т-эффекторы. Четвертый тип тимоцитов - киллеров (убийц) накапливается под влиянием антигенной стимуляции Т-эффекторов и завершает тем самым иммунные реакции клеточного типа. Особое значение в настоящее время придается взаимоотношению Т-хелперов и Т-супрессоров, которые обладают способностью тормозить и останавливать антителопродукцию, обеспечивая иммунологическую толерантность (Л. Н. Фонталин, Л. А. Певницкий, 1978, и др.).
Для определения функциональной активности Т-системы применяются следующие методы: подсчет циркулирующих Т-лимфоцитов, реакция бластной трансформации лимфоцитов (РБТЛ), реакция ингибиции миграции лимфоцитов (РИМЛ), спонтанное розеткообразование клеток (Е РОК), чувствительность лимфоцитов к кортизолу, цитотоксические тесты при использовании антисывороток к Т-лимфоцитам, определение функциональной активности Т-супрессоров и др. (А. Н. Чередеев, 1976, и др.). Наиболее информативными методами являются РБТЛ и Е-РОК.
Метод РБТЛ основан на том, что Т-лимфоциты в питательной среде под влиянием стимулятора фотогемагглютинина (ФГА) могут превращаться (трансформироваться) в недифференцированные зародышевые клетки (бласты). Допускается, что это происходит за счет освобождения лизосомальных ферментов и разрушения РНК- Чем интереснее происходит превращение лимфоцитов в бласты, тем активнее и полноценнее Т-система (О. И. Епифанова с соавт., 1977).
Существует два метода определения РБТЛ : морфологический и изотопный. Наиболее перспективным методом является изотопный, основанный на определении блаеттрансформацин по включению меченого тимидина (Из) в ДНК лимфоцитов (И. Н. Брауде, 1969; П. Г. Назаров, В. И. Пуринь, 1975, и др). Результаты выражаются в индексах стимуляции.
По данным С. К. Евтушенко (1980), у доноров норма РБТЛ с ФГА составила 61,71 ±9,72 (размах индекса стимуляции после 72 ч инкубации составил от 18,36 до 231,24), что близко к данным литературы (А И. Евсеева с соавт., 1976). Для оценки спецификой сенсибилизации противомозговыми антителами Т-лимфоцитов вместо ФГА в инкубируемую смесь мы добавляли по 1 капле водно-солевого экстракта мозгового антигена (МАГ), приготовленного из различных участков мозга, предварительно определив его митогенпую активность (то есть находили минимальное количество антигена, которое вызывало бластн>ю трансформацию лимфоцитов). Параллельно проводится контроль без ФГА, МАГ и других антигенов.
Реакция спонтанного розеткообразования Т-клеток основана на образовании розеток из Т-лимфоцитов и эритроцитов барана (Е-РОК), которые являются индикаторами (маркерами) Т-лимфоцитов (М Jondal с соавт., 1972). В ограниченном препарате среди всех типов лейкоцитов подсчитывается процент розеткообразующих лимфоцитов. Норма Е-РОК, по нашим данным, составила (51,0+9,7)%, что также близко к данным литературы (С. И. Донское с соавт., 1975, и др.).
Низкий процент розеткообразования лимфоцитов говорит о пониженной активности Т-лимфоцитов, а если он резко снижен, то это указывает на иммунодефицитное состояние (R. Hong, 1977, и др.), требующее соответствующей иммуностимулирующей коррекции.
Проводятся попытки классифицировать поражения нервной системы при аллергии (С. И. Каплаи, 1967; Я. В. Медведев, 1968; W. Wilson, 1967, и др.). В частности, F. Speer (1967) предлагает многообразие всех клинических форм этой патологии объединить в общее понятие «нейроаллергия». Ряд авторов рассматривают нарушения нервной системы при аллергии как часть общего аллергического процесса (Н. К. Боголепов, С. И. Каплан, 1971; Б. С. Агте, С. К. Евтушенко, 1974; J. Blamantier, S. Denimal, 1966, и др.).
Наши последующие исследования (Б. С. Агте, С. К. Евтушенко, 1976, 1980) также подтверждают эти выводы, в связи с чем неврологические проявления аллергии в клинической практике мы условно называем нейроаллергопатией.
